小花棘豆溶血毒素对兔脑神经细胞线粒体的影响

本研究首次证明小花棘豆(Oxytropis glabra DC)溶血毒素对兔脑神经细胞线粒体的结构和功能有显著影响,即:抑制线粒体细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活力,降低氧化磷酸化效率(ADP/O)、呼吸控制率(RCR),使呼吸激活迟缓,并引起线粒体超微结构的异常变化。该毒素还引起线粒体中至少两种分子量不同的蛋白质(MW=63000和55000)的裂解,其性质尚待进一步查明。     

冷冻保存对公猪精子功能的影响

试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精（IVF）试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔（MPTP）活性、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧（ROS）以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低（P<0.05）,冻精的顶体完整率也明显下降（P<0.05）;冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值（RFU）、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度（OD）值均显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精（P<0.05）;精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精（P<0.05）;而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著（P>0.05）。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。     

基于线粒体COII和ND4基因序列的塔里木裂腹鱼群体遗传多样性分析

为探究塔里木裂腹鱼群体的遗传多样性和遗传分化现状,选用车尔臣河、克孜勒河和阿克苏河3个不同地理种群的塔里木裂腹鱼共计126尾样本,进行线粒体DNA COII和ND4基因序列的对比分析,探讨了2种标记对塔里木裂腹鱼遗传多样性分析结果的差异和关系。结果显示,塔里木裂腹鱼线粒体DNA COII和ND4基因序列的A+T含量均高于G+C含量,碱基组成具有偏倚性。基于线粒体DNA COII和ND4基因序列分析,126个样本中分别确定了6个和23个单倍型,其中线粒体DNA COII基因序列中3个群体存在共享单倍型现象,线粒体DNA ND4基因序列中未发现3个群体间存在共享单倍型。2种标记下群体的单倍型多样性和核苷酸多样性分别为0.738±0.019/0.904±0.014和0.02129±0.00298/0.04876±0.00149,呈现出高单倍型多态性和高核苷酸多态性的特征。2种标记的分子方差分析（AMOVA）均表明,在所有群体中遗传变异主要来源于群体间,且车尔臣河群体的塔里木裂腹鱼与其他2个群体的遗传分化均达到显著水平（P<0.05）。贝叶斯法（BI）构建的BI树与单倍型网络图结构一致,塔里木裂腹鱼形成了2个分支。COII和ND4基因序列的岐点分布图均呈现双峰型,表明塔里木裂腹鱼现在的分布是先前分化种群发生二次交流的结果。种群结构分析结果亦表明塔里木裂腹鱼已分化出2个明显的地理种群,故建议将车尔臣河群体作为塔里木裂腹鱼的亚种。     

缺铁胁迫对草莓幼苗光合特性及细胞器铁含量的影响

为了探讨缺铁胁迫对草莓（Fragaria ananassa Duch.）幼苗的光合特性及细胞器铁含量的影响,本研究选取4个草莓品种（红颜、 章姬、 甜查理、 童子一号）幼苗,采用溶液培养方法,设置Fe（Ⅱ）-EDTA浓度为0 mol/L、 110-4 mol/L两组处理,分别于处理后0、 4、 8、 12、 16 d对其叶绿素含量（SPAD）、 光合速率（Pn）、 叶绿体铁含量、 根系线粒体铁含量以及叶片铁含量、 根系铁含量、 生物量进行分析。结果表明,缺铁胁迫显著降低草莓幼苗叶绿素含量、 光合速率、 叶绿体铁含量、 叶片铁含量、 根系铁含量、 生物量,并且不同品种间差异达显著水平（P0.05）;缺铁胁迫对根系细胞线粒体铁含量影响较小。草莓的叶绿体铁含量与叶片铁含量、 叶片净光合速率和生物量呈极显著正相关（r=0.93**, r=0.87**, r= 0.72**）, 根系线粒体铁含量与叶片铁含量、 叶片净光合速率和生物量呈极显著正相关或显著正相关（r= 0.83**, r= 0.72**, r= 0.52*）。本试验条件下,供试草莓品种红颜受缺铁胁迫的影响大于其他3个品种。     

MicroRNA profile analysis of ischemic myocardial tissues from rats with acute myocardial infarction

AIM：To identify differentially expressed microRNAs (miRNAs) in ischemic myocardial tissues from the rats with acute myocardial infarction (AMI) by miRNA array technique, and to predict their targets and analyze their functions using bioinformatics. METHODS：The rat models of AMI (n=3) were prepared by ligaturing the left anterior descending coronary artery (LAD) of Wistar rats. Electrocardiogram and blood pressure were detected during the operation, and the myocardial infarct size was measured by 2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining. Ischemic myocardial tissues were isolated from the infarct area 4 h after ischemia. The same procedure in sham group (n=3) was performed except for ligaturing LAD. Total RNA was extracted from ischemic and normal myocardial tissues. miRNA was isolated from total RNA, labeled with Cy3 and hybridized on miRNA array. Real-time PCR was applied to verify the reliability of miRNA array results. The targets of differentially expressed miRNAs were predicted and their functions were analyzed by bioinformatics. RESULTS：Rat model of AMI was successfully prepared and verified by electrocardiogram detection, blood pressure measurement and pathological observation. Compared with sham group, microarray screening showed that total 11 AMI-related miRNAs were selected, including 6 up-regulated and 5 down-regulated. Three of them (rno-miR-181c, rno-miR-146b and rno-miR-208) were related to the cardiovascular functions, while the functions of the others (rno-miR-672*, rno-miR-743b, rno-miR-128, rno-miR-138-1*, rno-miR-336, rno-miR-138-2*, rno-miR-325-3p and rno-miR-3572) were unknown and might be novel AMI-related biomarkers. Parts of the miRNA targets were also related to the cardiovascular functions. CONCLUSION：Differentially expressed miRNAs in AMI rats may serve as novel biomarkers for diagnosis of AMI and potential targets for treatment of AMI.     

虾夷扇贝毒素对Hela细胞凋亡的诱导及胞内钙离子浓度的影响

通过MTT分析、光学显微镜观察、Hoechst33342染色质荧光染色、DNA琼脂糖凝胶电泳、罗丹明123染色及钙离子激光扫描显微镜检测等手段,分析了虾夷扇贝毒素(yessotoxin,YTX)对Hela细胞的毒性作用.通过实验发现,正常Hela细胞与不同浓度YTX共孵育24 h后,一定浓度的YTX能对Hela细胞产生毒性作用,使其发生明显凋亡特征,如形态变化、染色质凝缩、DNA片段化以及线粒体膜电位降低.此外,YTX还能造成Hela细胞内胞质钙离子升高.这种毒性作用可能是YTX通过对胞内钙离子浓度的影响进而诱导发生的.     

Iron deficiency on corn root mitochondrial adenosine triphosphatase activity

Abstract

Iron deficiency significantly reduced corn root mitochondrial ATPase (adenosine triphosphatase) activity. The root mitochondrial ATPase had two pH optima. In the presence of K and Mg ions, ferrous ion stimulated the ATPase activity especially when plants were Fe‐deficient.     

海洋双吲哚化合物FGFC1对心血管血栓模型大鼠血浆FDP、D-D、Plg的影响

建立大鼠心血管血栓模型及观察海洋双吲哚生物碱FGFC1溶解大鼠心血管血栓的纤溶特性。采用异硫氰酸荧光素(Fluorescein 5-isothiocyanate, FITC)标记的纤维蛋白诱导法建立大鼠心血管血栓模型。低场核磁、冰冻切片荧光扫描和苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE)成像观察大鼠心血管血栓模型建立情况。荧光分析方法检测空白组、对照组、u-PA阳性对照组、FGFC1低、中、高剂量给药组大鼠的血浆荧光强度,ELISA法测定各组大鼠血浆纤维蛋白降解产物(Fibrin Degradation Product, FDP)含量、D-二聚体(D-Dimer, D-D)含量以及纤溶酶原(Plasminogen, Plg)活性。FITC标记的纤维蛋白原(Fibrinogen, FIB)在还原性SDS-PAGE显示为FITC-α、FITC-β、FITC-γ 3条肽链,FITC-fibrin荧光显微镜下显示绿色荧光,表明标记成功。低场核磁成像显示造模组大鼠心脏组织密度升高,冰冻切片荧光扫描显示心脏血管存在荧光物质斑块,表明心血管血栓模型建成,同时HE染色组织切片显示造模组心肌纤维异常。FGFC1的 2.5 mg/kg、5.0 mg/kg以及10.0 mg/kg剂量给药组大鼠血浆荧光值、Plg活性水平显著低于空白组,FDP水平、D-D水平显著高于空白组。研究表明,海洋双吲哚生物碱FGFC1针对FITC-fibrin诱导形成的大鼠心血管血栓模型能降低其体内Plg活性,促进血栓纤维蛋白降解。     

鱼油或共轭亚油酸对小鼠卵母细胞体外发育能力和线粒体功能的影响

为研究富含n-3或n-6多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)日粮对小鼠卵母细胞体外发育和线粒体功能的影响,把90只14g左右昆明雌鼠随机分为3组,分别饲喂40g/kg豆油日粮,40g/kg鱼油日粮或40g/kg共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)日粮30d;注射雌激素诱导小鼠超数排卵后,检测卵母细胞活性线粒体分布、线粒体钙浓度、膜电位以及脂肪滴分布;利用体外受精技术,评价卵母细胞体外发育能力。结果表明:相对于每个活性线粒体的分布,饲喂鱼油日粮的小鼠卵母细胞内层钙的分布比豆油日粮组有所升高(P<0.05),但是各组卵母细胞的活性线粒体比例和膜电位均没有显著性改变。另外,鱼油日粮组小鼠卵母细胞内脂滴密集,而CLA日粮组小鼠卵母细胞脂肪滴分布不均匀,每个卵母细胞所含脂肪较少。各日粮组卵母细胞受精率(2-细胞)没有显著性差异,但是CLA日粮组受精卵发育至桑葚胚和囊胚的比率分别比豆油组降低51.80%(P<0.05)和62.19%(P<0.05),比鱼油组降低52.97%(P<0.05)和60.89%(P<0.05)。因此,小鼠饲喂鱼油日粮可扰乱卵母细胞内钙平衡,但未改变其体外发育能力;CLA日粮可能通过促进卵母细胞内脂肪的降解从而降低受精卵体外发育率。     

硅对盐胁迫下黄瓜根系线粒体呼吸作用及脂质过氧化的影响

以黄瓜根系离体线粒体为研究对象,观察了盐胁迫对线粒体辅酶Q10(CoQ.10)、脂质过氧化物(LPO)、过氧化氢(H2O2)含量和线粒体呼吸功能及其有关酶的影响,以及盐胁迫下添加外源Si后这些指标的变化。试验设对照(CK)、盐胁迫(NaCl)、和盐胁迫加硅(NaCl+Si)。结果表明,盐胁迫下线粒体H2O2和丙二醛(MDA)的含量显著增加,线粒体膜流动性降低,CoQ10含量下降,与能量代谢相关的ATP酶及呼吸酶细胞色素c氧化酶(CCO)显著下降,引起线粒体膜损伤。加入外源Si后,线粒体H2O2和MDA的含量降低,膜流动性增加,CoQ10含量、ATP酶及细胞色素c氧化酶活力增加。表明Si可能通过促进线粒体ATPase与CCO活性的恢复,CoQ10含量的增加及减少氧自由基的损害而对线粒体产生保护作用,提高线粒体的氧化磷酸化及能量代谢,从而提高线粒体的呼吸作用。